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Sala cuna Vegetal
Reproducción por Micropogagación
La Biotecnología en el sector forestal y agrícola se ha desarrollado en forma amplia en los últimos años. Una de las primeras herramientas utilizadas corresponde a la propagación masiva de material vegetal, con el fin de obtener clones. Esto significa que, con las técnicas adecuadas, es posible generar pequeñas plantas a partir de las hojas de un árbol o de partes de una planta, las cuales darán origen a una planta genéticamente idéntica a la original, permitiendo la reproducción de los mejores ejemplares.

¿Qué vamos a hacer?


En este experimento vamos a demostrar que a partir de hojas es posible obtener pequeñas plantitas.

 

¿Qué Necesitamos?

  • Hojas de clavel (con su tallo)
  • Gelatina sin sabor
  • Agua destilada
  • Etanol (diluir alcohol a 70%, 70 ml de alcohol y 30 ml de agua destilada)
  • Nutriente líquido para plantas
  • Jabón desinfectante (que tenga actividad bactericida por ejemplo el rotulado "Higienic")
  • Cloro al 15% (cuidado en la manipulación)
  • Fungicida común (benomilo 2gr en 1 litro de agua)
  • Jarros de vidrio, esterilizados en olla a presión (mínimo 6 frascos como los de alimento para bebés, según el número de experimentos a realizar y la cantidad de grupos)
  • Pinzas
  • Agua
  • Cucharas
  • Scotch, etiquetas, toalla de papel absorbente
  • Papel aluminio
  • Guantes quirúrgicos
¿Cómo lo hacemos?

1. Preparen la gelatina sin sabor con la mitad de agua indicada en el envase. Dejen hervir dos minutos para esterilizarla. Dejen enfriar y agreguen gelatina hasta cubrir una superficie de 2 cm de altura en cada frasco de vidrio previamente esterilizado, añadan 3 gotas de nutriente líquido para plantas y coloquen rápidamente la tapa para evitar contaminación. Dejen cuajar la gelatina. Se recomienda preparar los frascos 2 a 3 días antes de iniciar las experiencias y eliminar cualquier frasco que esté contaminado. Estas precauciones son importantes para evitar que en la gelatina crezcan bacterias u hongos que se encuentran en el ambiente, las que pueden contaminar las hojas y no generar las plantas.

2. Para la preparación de los tallos se debe trabajar bajo condiciones estériles, lavar bien las manos, y limpiar el lugar de trabajo con etanol al 70%. Los tallos se desinfectan bien sumiéndolos durante un par de horas en el fungicida común preparado (ojalá este proceso sea realizado por el profesor antes de empezar la experiencia), posteriormente se lavan bien con agua corriente. Luego se sumergen los tallos en etanol al 10% (10 ml alcohol + 90 ml agua) durante cinco minutos agitando constantemente. Se enjuaga con agua destilada 3 veces por 3 minutos cada lavado. Inmediatamente se sumergen los tallos en cloro comercial al 15% (preparar) y se agita cuidadosamente por 10 minutos. Se enjuaga con agua destilada estéril durante cinco minutos tres veces.
3. Al colocar los tallos en los frascos es necesario trabajar con una pinza que ha sido pasada por etanol al 70%. Tomen un trozo de tallo del recipiente y dejen que escurra el exceso de líquido. Rápidamente insértenlo suavemente hasta la mitad de la gelatina, ocupando el menor tiempo posible. Repitan esta operación 6 veces (6 tallos por cada frasco). Asegúrense de cerrar bien el frasco, pero con la precaución que ingrese aire a éste, es decir, dejar el frasco cerrado, pero no herméticamente, un poco suelta la tapa.

4. Tomen un frasco con fragmentos de tallos y déjenlo a temperatura ambiente durante un par de semanas. Anoten las observaciones y dibujen lo observado.

5. Tomen otros dos frascos, envuelvan uno con papel aluminio y el otro déjenlo descubierto. Coloquen ambos recipientes en un lugar donde reciban luz solar.
6. Tomen 1 frasco y en cuanto estén insertados los trozos de tallos en la gelatina, colóquenlo invertido. Observen el crecimiento y desarrollo de las plantas.
7. Envuelvan los frascos restantes en papel de aluminio y colóquenlos a diferentes temperaturas: refrigerado, ambiente, en agua, etc.
8. Envuelvan en papel aluminio un frasco con plantas ya desarrolladas (cerca de 2 cm). Hagan un orificio de 3 cm de diámetro en el papel y márquenlo con un lápiz. Ubiquen el recipiente de manera que el orificio quede enfrentando la luz. Anoten las observaciones.
El papel de aluminio se utiliza con el fin de generar un ambiente de oscuridad para observar la respuesta de las plantas. Las condiciones ambientales que normalmente se utilizan corresponden a aquellas de temperatura y luz óptima para la especie. Esto se logra al utilizar cámaras de germinación, aunque también se puede alcanzar el desarrollo de plantas a diferentes temperaturas, tratando de igualar lo más posible las condiciones óptimas en que crece y se desarrolla la planta.
La Micropropagación y la Embriogénesis Somática son técnicas que se utilizan en Chile para obtener clones de las mejores plantas para su cultivo, desarrollo y posterior explotación por la industria forestal, mejorando la productividad de las plantaciones de bosques.

Sofía Valenzuela Águila, Doctora en Recursos Naturales, Departamento de Silvicultura, Facultad de Ciencias Forestales, Universidad de Concepción

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