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Lactobacilos ¿Qué son y para qué sirven?
Son
bacterias "amistosas”, con forma de bacilos (bastones), y sin
movimiento propio, capaces de generar un equilibrio de la microflora bacteriana
desde donde se aíslan, protegiéndonos contra potenciales
invasores dañinos que se inhalan o ingieren, favoreciendo así
la salud del hombre o animal que los posea. Probiótico es una palabra de origen griego que significa "a favor de la vida". Bajo este concepto se denomina a los preparados que contienen bacterias benéficas y que al incorporarlos en los procesos de elaboración de productos lácteos, embutidos y nutracéuticos, mejoran su calidad y desplazan a bacterias patógenas, que pudieran originar enfermedades en los consumidores. Administrados a humanos y animales, los probióticos favorecen el equilibrio microbiano en la piel, tracto respiratorio, digestivo y genitourinario. En Chile, el estudio y desarrollo de probióticos es aún incipiente. Los invitamos a conocer el microscópico mundo de los lactobacilos a través del desarrollo de un experimento |
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| MANOS
(MUY LIMPIAS) A LA CIENCIA ¿QUÉ NECESITAMOS? |
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Agua
Estéril: Llenen botellas de vidrio con agua de la llave.
Deposítenlas en olla a presión. Hervir por 15 minutos. Listo.
Este procedimiento sirve para esterilizar todos los materiales como tips,
envases y otros. |
Los
materiales más especializados se compran en laboratorios de equipos
e insumos médicos |
| OBTENCIÓN DE CEPAS DE LACTOBACILOS |
Alimentos: Yogur natural o de pajarito, salame, queso. Mucosa bucal: Hisopado (frotado) vigoroso con una tórula o tip, previo al lavado de los dientes, de las paredes de la boca, encías, lengua y la cara interna de los dientes para obtener muestras aptas para el estudio. Secreciones y tejido: Fecas recientes de pollos, gallinas o cerdos. |
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¿CÓMO
PREPARAMOS EL MEDIO DE CULTIVO? |
El suero de leche o queso tiene algunos componentes básicos para
el crecimiento de lactobacilos u hongos benéficos. Si viene líquido,
primero deben filtrar para eliminar impurezas, pasando el suero a través
de un embudo con papel absorbente (toalla de papel o filtro de café).
Si viene en polvo o se empleará leche descremada, diluyan 4 gramos
en 100 ml de agua destilada o estéril. Por cada 100 ml de alguna
de estas preparaciones agreguen 1 gramo de extracto de levadura y/o peptona
de caseína. Envasen 5 ml de este preparado en los tubos de tapa rosca, sin que quede la tapa muy apretada. Depositen los tubos en un vaso precipitado o en un tarro, sin que se vuelquen y pónganlos a hervir por 10 minutos en olla a presión con agua que cubra hasta la mitad del vaso o tarro. Los medios de cultivo están listos para recibir las muestras. Guárdenlos en refrigerador a 4† C. Sólo se sacan 20 minutos antes de realizar la siembra de las muestras. |
| ¿CÓMO DEPOSITAMOS LAS MUESTRAS EN ESTOS MEDIOS DE CULTIVO? |
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| Obtención de muestras ¡OJO CON LA CONTAMINACIÓN! |
A) Depositen la tórula
que contiene la muestra de lengua, dientes y encías dentro de los
tubos con medios, frotándola en las paredes para desprender bien
la muestra. Esta tórula luego se elimina. |
| DESCUBRAMOS LOS LACTOBACILOS | |
Si
existe crecimiento bacteriano en los tubos con medio, se observará
mayor densidad en los tubos con un precipitado en el fondo de estos, característico
de los lactobacilos. En una superficie de trabajo limpia y con el mechero encendido, agiten suavemente los tubos y ábranlos. Con una tórula estéril, extraigan una gota del medio con crecimiento, y deposítenla sobre un portaobjeto limpio. Recuerden rotular los portaobjetos con el nombre de la muestra. |
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| Si
se dispone del set de tinción de Gram, las muestras depositadas en
los portaobjetos se dejan secar al medio ambiente para luego sellarlas en
la llama del mechero, pasando el portaobjeto rápidamente unas 3 veces
a través de la llama sin quemarla. Luego se procede a la tinción
y a la visualización en el microscopio. Si no se dispone de set de tinción de Gram, cubrir la muestra (fresca, sin secar) depositada en el portaobjeto, con un cubreobjeto y observarla al microscopio. Pueden observar el crecimiento bacteriano a través del microscopio, durante un tiempo máximo de 48 horas. |
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| ¿QUÉ OBSERVAREMOS? | |
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Si
existen morfologías compatibles con lactobacilos, observaremos
bacterias sin movimiento, alargadas como bastones, filamentos, o más
cortas, aisladas o en cadenas. Si se observan con tinción de Gram
se verán de color azul violeta. Es muy probable además que
se observen otros microorganismos como “cocos”, “levaduras”,
etc. Esto debido a que los productos alimenticios utilizados como inóculos
raramente poseen sólo lactobacilos y nuestro medio de cultivo probablemente
sea apto para el crecimiento de otras bacterias. Por otro lado, el inóculo
obtenido desde la boca contendrá, además de lactobacilos,
muchas otras bacterias que forman parte de nuestra flora bucal normal.
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He
aquí entonces a las bacterias benéficas, que están
protegiendo al humano o animal del que se aislaron... o están mejorando
la calidad del alimento que luego consumiremos. En los laboratorios de
biotecnología, estas bacterias son sometidas a procesos de identificación
y análisis de sus propiedades probióticas. Se espera que con el desarrollo de los probióticos, tanto los seres humanos como los animales nos beneficiemos en aspectos como la prevención de enfermedades y protección de la salud, disminución de los costos de producción de agentes para la investigación y un mejoramiento de la calidad de productos agropecuarios. |
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Erica
Castro Inostroza, Matrona, Directora General Proyecto FONDEF
N° D 01 I 1121; Magaly Encina, Bióloga
Marina, Javier Ferrer, Ingeniero Civil Químico,
Magaly Sánchez, Bioquímico, Laboratorio
Bacterias Lácticas, Universidad de Concepción |